Un test de diagnostic rapid sau un test de screening rapid (RDT) este un test de screening care stabilește rapid (în câteva minute) prezența sau nivelul unui compus (analitul) pentru a stabili diagnosticul. De exemplu, un marker al bolii sau un parametru fiziologic . În general, efectuează reacții chimice sau enzimatice sau imunologice care dezvăluie o anumită colorare, permițând interpretarea imediată a rezultatului. Sunt prezentate ca kituri de unică folosință (consumabile) care grupează tuburi și flacoane, sau benzi sau casete (uneori numite săpunuri ). Alte tipuri de dispozitive de diagnosticare folosesc detectoare electronice (optoelectrice, termice, conductanțe etc.). ..) rareori pentru o singură utilizare, ceea ce îl face echipament sau dispozitiv de diagnosticare (atunci nu este tratat aici). Aceste teste sunt concepute pentru a fi utilizate în cabinetul biomedical al medicului, dar și la pat (punct de îngrijire), sau pentru anumite aplicații ale individului însuși, și pe teren (teste de teren) la mediu sau controlul contaminării în industrie.
Există teste rapide de diagnostic pentru a detecta multe boli infecțioase ( angina pectorală , malaria , HIV ), altele vizează controlul anumitor parametri medicali patologici (diabet) sau nu ( sarcină , infarct ). In plus, testele rapide sunt disponibile pentru aplicații non-medicale, cum ar fi analiza biochimici parametrilor în apă ( de exemplu , piscine ), aer , produse alimentare , etc.
Probele analizate sunt de obicei, în medicină, sânge (sau ser sau plasmă), urină , salivă sau scaun și în mediul apei, solului, suprafeței etc. sunt necesare tampoane (tampoane nazale pentru teste de gripă , tampoane pentru gât pentru streptococ a, uretral sau tampoane cervicale pentru detectarea chlamydia , etc. ).
Există 3 tipuri principale de operațiuni:
Există multe aplicații pentru teste rapide, de la medic / paramedical la mediu sau industrie.
Unul dintre cele mai cunoscute teste rapide este, în mod surprinzător, testul de sarcină vândut publicului larg în magazinele cu amănuntul.
O altă aplicație populară este cuantificarea glicemiei la diabetici . Această aplicație este apoi cuplată la o sursă de iluminare care permite cuantificarea absorbanței în anumite lungimi de undă și astfel este posibilă stabilirea cu certitudine a concentrației de glucide din plasmă .
Există teste rapide pentru poliție și diferite organe de control, pentru verificări pe teren înainte de a le confirma sau a le clarifica prin teste de diagnostic în laborator. De exemplu, detectarea alcoolului în sânge (etilotest), pentru verificări la marginea drumului. Dar, de asemenea, detectarea și preidentificarea medicamentelor din salivă sau urină (vezi sânge) și pe suprafețe. Vizualizarea sângelui la locul crimei constă dintr-un reactiv (adesea luminol) și un detector (UV sau luminescent) - nu prea mult dintr-un test rapid alcătuit. Idem pentru vizualizarea amprentelor digitale (de exemplu: cu colorant negru amido).
Testele rapide sunt dezvoltate pentru a analiza eșantioane ale mediului de mediu din teren. Un prim format corespunde benzilor indicatoare colorate pentru a măsura aciditatea / alcalinitatea apei și lichidelor (pH-ul) și a diferiților ioni. Un alt format este format din unul sau două tuburi cu un reactiv care dezvoltă, de asemenea, o reacție de culoare, cu o probă lichidă sau solidă. Un alt format corespunde unui dispozitiv de prelevare și unui mediu de cultură pentru identificarea bacteriilor. În cele din urmă, există teste imunometrice ca și în medicină pentru analiți pe care doar un anticorp le poate detecta în mod specific, dar cel mai adesea formatele multi-eșantion și multi-parametrice sunt adesea procesate mai profitabil în laborator după o campanie de colectare a eșantioanelor. De exemplu, s-au dezvoltat anumiți anticorpi specifici metalelor grele și fac posibilă detectarea prezenței lor în mai multe matrice, începând cu apa destinată consumului uman. Detectarea test rapid al contaminării mediilor de agenți patogeni ar putea dovedi utile cu creștere și globale amenințări (viruși și alte epidemii. Ex detectarea SARS-COV2 în stațiile de epurare a apelor uzate și o monitorizare epidemiologică a Covid19 ).
Dispozitivul și manipularea sunt foarte simple: reactivul este imobilizat pe o fâșie de hârtie sau plastic și își schimbă culoarea aproape imediat când este îmbibat în probă (care trebuie să fie lichidă). Este, de exemplu, o bandă pentru detectarea pH-ului apei, închiderea apei unei piscine etc. Folosesc unul sau mai multe (până la 4) indicatoare colorate.
Aceste teste sunt omoloage cu banda de testare, dar produc o schimbare a culorii în soluție și acceptă detecții mai complexe (cu enzimă sau chiar anticorp). Acestea sunt kituri cu unul sau mai multe tuburi, unul sau mai mulți reactivi și accesorii pentru colectarea probelor (solide sau lichide) și transferul acestora (și reactivi lichizi). De obicei, proba este pur și simplu plasată într-un tub care conține un reactiv lichid. O incubație mai mult sau mai puțin lungă dezvoltă o culoare (sau o schimbare de culoare) pe care o apreciem vizual (totul sau nimic și comparată cu o scară de culoare). Unele detecții / analiți necesită ca incubația să se facă prin încălzire (incubator) sau să fie adăugat un al doilea reactiv. În unele configurații, poate exista un reactiv solid, reactivul solid sau lichid (sau o fază a reactivului lichid) trebuie să fie și îndepărtat, există o etapă de filtrare, ...
Aceste teste funcționează puțin pe principiul testelor colorimetrice de mai sus, dar reactivul este conținut într-un gel turnat într-un recipient mic, care este în general steril, deoarece este vorba de detectarea bacteriilor (de apă, suprafețe contaminate). Proba (lichidă sau solidă) este plasată pe gel și închisă rapid (semi-sterilitate) pentru a fi incubată timp de ore până la câteva zile. Petele colorate generate pe gel indică prezența bacteriilor specifice reactivului. Aceste teste nu sunt rapide, dar rămân simple, adaptându-se la domeniul testelor microbiologice efectuate în laborator (în adevărată sterilitate).
Cele mai vechi teste de diagnostic „rapide” din istorie pot fi urmărite până în papirusul din Berlin, datând din 1350 î.Hr. AD În acest papirus, un test de sarcină primitiv, inclusiv orz și grâu, pe care se depunea urina femeilor însărcinate presupuse; dacă boabele de orz au încolțit, femeia avea reputația că așteaptă un copil de sex masculin; dacă boabele de grâu încolțeau, femeia avea reputația că așteaptă un copil; în cele din urmă, dacă boabele nu germinau, se considera că nu era însărcinată. Aceste rezultate au fost reproduse de oamenii de știință și acest test a dat 70% rezultate valide.
Primele teste reale de imunodiagnostic au apărut în anii 1950. În mod surprinzător, a doua zonă de inovație pentru acest tip de test a fost detectarea sarcinii la femei, implicând aglutinarea unui anticorp, a celulelor roșii din sânge, în fază. Alte teste au detectat, de asemenea, bacteriile prin aglutinare cu anticorpi sau lectine. Inovația principiului imunotestului a evoluat prin imobilizarea anticorpului (sondă specifică) și înlocuirea celulelor roșii din sânge cu particule vizibile care sunt mai controlabile și mai stabile (microsfere din latex, apoi poliesterină în general colorate), apoi prin nanoparticule. ) care generează o schimbare de culoare după reacția antigen-anticorp. În cele din urmă, imunoanalizele de fază eterogenă au apărut cu ELISA și Blotting sau IHC, și în special imunoprecitarea.
Cel mai popular tip de test rapid este un test imunocromatografic, care combină imunoprecipitarea și blotarea (anticorpul sau antigenul este imobilizat pe o membrană) și, în special, în versiunea cu migrație capilară în fluxul lateral al probei. Apoi unul sau mai mulți reactivi .
Echipament și mod de funcționare (ICB)Un test imunocromatografic cu bandă (ICN) este în esență compus dintr-un suport care transportă o membrană din care o zonă de depozit va primi proba și una sau mai multe zone sunt dedicate detecției, cu un absorbant la un capăt, precum și un reactiv lichid. , separat sau integrat la celălalt capăt. De altfel, pot exista o pipetă, un tub de colectare, un țepător etc.
Eșantionul prelevat prin intermediul unei pipete sau al țepătorului, este depus pe zona de „plecare” în volum definit, de unde se difuzează prin acțiune capilară în membrană. Se adaugă un reactiv, care conduce proba în zona de absorbție. În general, constă din anticorpi marcați cu nanoparticule de aur (sau latex colorat), care se leagă apoi în mod specific de analit. Pe zona de migrație, complexele analit-anticorp sunt capturate în mod specific de anticorpi (anti-anticorpi) imobilizați la unul sau mai multe niveluri care apoi apar în general sub formă de linii colorate (roz sau roșu pentru aur), markerul fiind concentrat acolo.
Există diferite variații. Poate exista o preincubare a anticorpului + reactiv, 2 reactivi de adăugat sau nici unul (inclus în dispozitiv), un reactiv de spălare, un antigen marcat, ...
În cele din urmă, există în general 2 zone de detectare a controlului, una pentru a confirma funcționarea testului (că proba și reactivul au migrat bine - evită falsurile negative) și una pentru a evita falsurile pozitive. Astfel, testul este pozitiv dacă utilizatorul vede o linie roșu-roz care apare pe linia de test, mai mult pe linia de control a testului. Nicio linie vizibilă pe această ultimă linie și / sau o linie vizibilă atât pe linia de testare, cât și pe cealaltă linie de control, invalidează rezultatul testului. În caz contrar, rezultatul testului este negativ. Avantajele tehnicii ICB.
Testul rapid ICB are puține componente în mișcare, ceea ce îl face mai convenabil și mai puțin predispus la erori. Aceste teste pot fi produse în masă deoarece suportul plastic este produs în masă, membrana funcționalizată de o mașină, anticorpii produși pe scară largă și reactivii în volume mici. Acestea permit astfel oferirea acestora la un cost redus și, prin urmare, distribuirea pe scară largă a acestor teste, care sunt utilizate pe scară largă, reprezintă o primă linie de diagnostic și monitorizare epidemiologică.
Dispozitive electronice de diagnostic rapidElectronica dezvoltă din ce în ce mai multe dispozitive mici care utilizează senzori sau senzori optoelectrici, termici, de conductanță etc. și electronice care convertesc și interpretează aceste date în parametri de diagnosticare. Unele dispozitive sunt mici dispozitive portabile autonome, altele măsoară și dau rezultatul în timp real, altele comunică datele oferind rezultatul de la distanță etc. Ca dispozitiv de diagnosticare rapidă, este necesar să se limiteze la detectoarele de unică folosință, în general sisteme micro-electro-mecanice (MEM)). Să ne cităm
Aceste teste detectează nivelul hormonului HCG. Un rezultat mai mare de 5 UI / litru diagnostichează sarcina. Primele teste au fost un test de aglutinare. Acestea sunt acum în principal teste imunometrice ICB. Practicitatea și fezabilitatea au fost mult îmbunătățite.
Confruntat cu un caz de angină pectorală , un RDT poate detecta prezența unui streptococ β-hemolitic de grup A ( Streptococcus pyogenes ), bacterii care pot fi responsabile de complicații rare, dar grave. Dar, în absența acestei bacterii, tratamentul cu antibiotice nu este, în general, justificat, deoarece angina poate fi apoi cauzată de viruși sau alte bacterii pentru care vindecarea este spontană. Cu toate acestea, diagnosticul diferențial numai pe baza semnelor clinice este foarte puțin fiabil. Din contra, testul realizat în mai puțin de 10 minute pentru a diagnostica aproape sigur prezența streptococilor din grupa A. Medicul generalist efectuează cu un tampon un frotiu pe amigdalele pacientului ei și diluează proba într-un test de soluție și scufundă un test dezbracă în el. Apariția unei benzi roz martor în următoarele secunde confirmă funcționarea corectă a testului. Prezența unei a doua benzi roz va dezvălui natura bacteriană (a grupului A strep gât).
Testele HIV Analiza alcoolemieiExemplu de companie specializată în cercetarea și distribuirea testelor medicale rapide: ALL.DIAG
Testele de droguriExistă teste care pot detecta toate (sau aproape) substanțele ilegale cunoscute. Până acum, aceste teste erau utilizate în principal de pompieri sau de serviciile de „urgență” ale spitalelor. Acest lucru permite pompierilor sau medicilor să știe cum să reacționeze și să înțeleagă reacția indivizilor. Utilizarea acestor teste este făcută și de poliție, militare, centre de toxicologie sau laboratoare. În ceea ce privește poliția franceză , până acum au folosit doar teste de alcoolemie, dar au folosit teste de salivă pentru detectarea canabisului de la începutul anului 2007 . Acest lucru a fost extins la alte medicamente; în 2015, sau 121.000 de teste au fost efectuate în Franța, pentru 53.000 pozitive. De la sfârșitul anului 2016, testul de sânge nu mai este necesar (dar infractorul îl poate solicita pe cheltuiala sa) prin generalizarea unor teste noi, mai eficiente. Testele identifică, de asemenea, droguri confiscate la vamă sau urme pe suprafețe.
Principalele companii care comercializează teste medicale rapide în Franța sunt NarcoCheck, ID PHARMA, ALL.DIAG , TODA PHARMA, Biosynex , Pharma D13 , Servibio , Nal von minden , Fumouze , Biomédical etc.
În Spania: Merk, Profas, Nal von minden, Zarilab Diagnostica SL, Acon, Biomereieux, Izasa, Eve Layper, Pervalab ...
În Germania: Merk, Profos, Nal von Minden, MP Biomedia ...