De bacteriile din Gram-negative sunt evidențiate printr - o tehnică de colorare numit colorația Gram . Bacteriile gram-negative apar apoi roz la microscop . Tehnica de colorare se bazează pe caracteristicile membranei și ale pereților bacteriilor. Cu toate acestea, acesta nu este un factor de clasificare filogenetic : într-adevăr, grupările Gram + și Gram - sunt ambele non- monofiletice .
După fixarea bacteriilor pe o lamă (două metode posibile: fixarea cu etanol la 90 ° (5 minute) sau prin trecerea lamelei prin flacără, numită frotiu ):
Lamela este apoi recuperată, clătită și uscată, apoi observată la microscopul optic, în general cu un obiectiv x100 + ulei de imersie. Bacteriile Gram negative vor apărea în roz. Observarea culorii lor este însoțită de obicei de descrieri structurale (de exemplu, bacil sau coajă ).
Bacteriile gram-negative au (cu unele excepții) o structură bimembranară care este organizată în trei părți mari, și anume, de la exterior la interior:
Membrana exterioară este în contact direct cu mediul extern. Este compus în principal din fosfolipide organizate într-un strat stratificat (partea hidrofilă la exterior și partea lipofilă la interior), dar conține, de asemenea, multe proteine intrinseci , în special proteine de transport numite porine . Multe bacterii Gram negative (de exemplu Salmonella ) au, de asemenea, un compus neproteic numit lipopolizaharidă sau LPS; acest compus slab imunogen , a cărui patogenitate (lipida A) este inclusă în membrana exterioară, este activat în timpul lizei bacteriilor. Membrana exterioară este conectată la peptidoglican prin lipoproteina lui Braun .
Spațiul periplasmatic este un spațiu de stocare pentru enzime , substanțe nutritive etc. Are multe alte funcții, în special în anumite etape ale biosintezei proteinelor și în metabolism . Este situat între membrana exterioară și membrana plasmatică și conține un strat de peptidoglicanii. Stratul de peptidoglican (numit și mureină) este relativ subțire în Gram negativ spre deosebire de Gram pozitiv .
Membrana plasmatică este similară cu membrana exterioară (cu excepția LPS). Are proteine poroase care se termină în spațiul periplasmatic (biosinteza proteinelor). Membrana plasmatică conține multe alte complexe proteice de importanță vitală pentru bacterii (cum ar fi ATP sintaza ) care au roluri majore în metabolismul bacterian.
Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că însuși faptul de a grupa bacteriile în aceste familii este pus în discuție, cu excepția familiei Enterobacteriaceae care, singure, au o asemănare genetică între ele și nu numai biochimic.