Legionella

Legionella Descrierea acestei imagini, comentată și mai jos Cultura Legionella sp. sub UV Clasificare
Domni Bacterii
Ramură Proteobacterii
Clasă Proteobacterii gamma
Ordin Legionellales
Familie Legionellaceae

Drăguț

Legionella
Brenner și colab. , 1979

Bacteriile din genul Legionella , Legionella , sunt bacili Gram negativi .

Ecologie

Acestea sunt bacterii prezente în mod natural în apă și nămol , responsabile de o boală respiratorie , legioneloza . Ele colonizează frecvent rețelele de apă, în special rețelele de apă caldă menajeră , sistemele de aer condiționat, precum și turnurile de răcire a aerului (TAR).

Condiții de proliferare

Legionella se dezvoltă și proliferează:

Legionella se înmulțește slab sub 20  ° C , se oprește din reproducere la 55  ° C și sunt distruse de la 60  ° C (conform unui timp de contact foarte precis) pentru distrugerea instantanee de la 70 - 74  ° C .

Condiții necesare contaminării

Prezența Legionella în apă nu este o condiție suficientă pentru a provoca boala. Trebuie să fie prezenți trei factori:

Niciun caz de legioneloză nu a fost diagnosticat în urma ingestiei de apă contaminată și nici nu a existat niciun caz de transmitere de la om la om. Cantitatea de inocul bacterian nu pare să influențeze dezvoltarea legionelozei. În cele din urmă, au fost incriminate factorii climatici (ploi abundente și umiditate, reapariția cazurilor în timpul verii).

Mai mult, factorii de susceptibilitate ai gazdei umane sunt necesari pentru dezvoltarea bolii, deși nu sunt pe deplin înțelese în prezent. Cu toate acestea, factorii de risc pot fi individualizați: vârsta înaintată, deficit de imunitate (cancer / boli de sânge, diabet), dar mai ales fumatul. Infecția este descrisă în mod excepțional la copii.

Limite sau praguri care nu trebuie depășite în timpul analizelor de apă

Limita de prag care nu trebuie depășită este de 1000  CFU / litru de Legionella pneumophila pentru apă caldă menajeră (ACM) și pentru turnurile de răcire cu aer (TAR), noul standard AFNOR NF T90-431 din noiembrie 2014, revizuit în august 2017 . Pentru ART, sunt stabilite 3 praguri: <1000  CFU / l  ; între 1.000 și 100.000  UFC / l și> 100.000  UFC / l . Ultimele 2 praguri necesită acțiuni curative din partea operatorului. În cele din urmă, rezultatele pot fi redate sub forma Florei de interferență.

Se estimează, în Europa, că 90% din legioneloză este legată de specia L. pneumophila și că, în medie, 85% se datorează exclusiv serogrupului 1. Serogrupurile de la 2 la 15 împart restul de 10%. Dimpotrivă, în Australia, este specia lungă care este responsabilă pentru majoritatea cazurilor de legioneloză. În cele din urmă, există alte 51 de specii din genul Legionella, denumită în mod obișnuit Legionella spp și al căror risc infecțios este discutat de igieniști și specialiști în boli infecțioase. Cu toate acestea, prezența Legionella spp demonstrează că condițiile rețelei sunt optime pentru înmulțirea legionellei și, prin urmare, potențial a Legionella pneumophila .

Există aproximativ 6.000 de  cazuri pe an în Europa și între 1.200 de  cazuri și 1.600 de cazuri pe an în Franța, cu o rată a mortalității cuprinsă între 10 și 15%, în ciuda tratamentului adecvat cu antibiotice (143 de decese pentru 1.262 de  cazuri raportate în 2013 și a căror evoluție este cunoscută numai pentru 1.168 de  cazuri , adică o letalitate de 12,2%) (fluorochinolone sau macrolide).

Legionella ecologie

Legionella sunt de origine hidro-teluric. Habitatul lor natural este reprezentat de medii acvatice naturale sau artificiale. Rezidă acolo, printre altele, în biofilme (reziduuri organice și microorganice formate în conducte și pe suprafața apei stagnante) care o protejează de clorurare și par să joace un rol important pentru supraviețuirea sa în instalații. Se găsește și în biofilmele sistemelor de apă menajeră, uneori asociate cu Pseudomonas aeruginosa . Pe lângă natura apei (aciditate, mineralizare, materie organică și conținut de nutrienți), temperatura și tipul de materiale utilizate în instalațiile sanitare joacă, de asemenea, un rol important în formarea biofilmelor.

Biofilmul se dezvoltă în special în:

În plus, protozoarele de apă dulce (inclusiv amibă ) reprezintă gazda naturală a Legionella în cadrul căreia își desfășoară o etapă a ciclului său de viață. Bacteria și gazda ei au cunoscut o evoluție convergentă permițând bacteriilor dobândite în moștenirea genetică a genelor care codifică majoritatea factorilor de virulență ai legionelelor. Comportamentul și virulența Legionella în mediul lor microbian este încă slab înțeleasă (de exemplu, capacitatea lor de a invada anumite protozoare) și amoeba, precum și mediul în sine: ecosistemul de biofilme în special, interacțiunile cu alte specii., Turbulența apei în rețele  etc. Cele ANSES a declarat în 2011 că „monitorizarea protozoare (amibele și ciliate) în unități și contribuția lor la periculozitatea instalațiilor la risc este prea mare măsură neglijate“ .

Riscurile

Legioneloza se poate manifesta sub două forme clinice distincte:

Infecția nosocomială este implicată în 1 până la 10% din cazurile de pneumonie nosocomiale.

Ciclul infecțios al L. pneumophila

Legionella pneumophila este capabilă să infecteze amibă acvatică, precum și macrofage alveolare și pneumocite ale oamenilor, urmând un ciclu infecțios similar.

La contactul cu celula gazdă (amibă sau macrofage), L. pneumophila folosește principalul său factor de virulență: sistemul său de secreție de tip IV Dot / Icm. Acest sistem va permite bacteriilor să injecteze direct în citoplasma gazdei sale mai mult de 300 de proteine ​​bacteriene numite efectori. Aceste proteine ​​vor permite bacteriei să devieze diferite utilaje celulare ale gazdei sale în avantajul său.

Unii dintre acești efectori sunt implicați în mecanismele de intrare în celula gazdă prin deturnarea proceselor de macropinocitoză sau fagocitoză. Aceste proteine ​​bacteriene sunt, de asemenea, necesare pentru ca bacteriile să scape de degradare pe calea endosomală a gazdei, în special efectorul SidK. Aceștia participă, de asemenea, la crearea unei vacuole de replicare pentru bacterie, numită LCV pentru vacuolul care conține Legionella, care se caracterizează în special prin recrutarea veziculelor provenite din reticulul endoplasmatic. Mulți efectori ai sistemului Dot / Icm sunt implicați în acest proces: SidM / DrrA, SidC, RalF, LepB etc. Camuflat astfel în LCV, legionela va putea să se înmulțească exponențial până când va epuiza toate resursele nutriționale disponibile. Această deficiență declanșează apoi o reprogramare a expresiei genetice a bacteriei care apoi își exprimă factorii de virulență (efectori ai sistemului de secreție de tip IV în special) și factorii de mobilitate (flagel). Bacteriile sunt apoi eliberate în citoplasma gazdei și apoi în mediul în care vor trebui să supraviețuiască, uneori sub formă de biofilme, până când o nouă celulă gazdă este infectată.

Ce trebuie făcut pentru a monitoriza riscul de Legionella?

Pentru rețelele ACM:

Ce trebuie făcut dacă rețeaua ECS este infectată?

Există diferite metode pe care Ministerul Sănătății le-a testat și validat pentru rețelele de apă potabilă. Aceste metode apar în circulara 2002/243 dinAprilie 2002. Găsim în special:

Șocul cu peroxid de hidrogen și argint (H 2 O 2+ Ag) care constă în circulația soluției prin rețea și puncte contaminate (atunci când nu este utilizată) la o concentrație cuprinsă între 100 și 1000  mg / L de peroxid de hidrogen + ag pentru un timp de contact de până la 'la ora 12 . La sfârșitul timpului de contact, se efectuează o golire completă a rețelei. Unul dintre avantajele acestei metode este distrugerea biofilmului.

Șocul cu clor constă în obținerea unei concentrații de clor liber de 15  mg / l timp de 24 ore sau de 30 până la 50  mg / l timp de 2 până la 3 ore la nivelul rezervoarelor. O golire completă a rețelei se efectuează după ce a trecut apa clorurată prin maximul sau chiar toate punctele de utilizare.

Șocul termic se realizează prin ridicarea temperaturii apei la 70  ° C timp de 30 minute , iar apa trebuie să curgă la toate punctele de utilizare 5 până la 10 minute sau mai mult la 65  ° C .

Riscuri asociate șocurilor:

Supravegherea Legionella

Pentru TAR (turnul de răcire sau turnul de răcire a aerului) , legea din 2004 privind sănătatea publică a avut drept scop reducerea numărului de cazuri de legionelă cu 50% pentru perioada 2004-2008. Decretele din 2004 au evoluat prin cele din14 decembrie 2013.

Pentru rețelele de apă caldă menajeră (apă caldă menajeră) , este necesar să vă bazați pe ordinele1 st februarie 2010(lupta și prevenirea contaminărilor rețelelor de apă caldă menajeră de către legionella. S-ar părea logic să se respecte amibele (care sunt a priori un indicator și factorul de risc), dar pot exista legionele fără amibă, iar metoda comună de detectare a amibei este costisitoare, consumatoare de timp și nu toate laboratoarele sunt echipate să-l ofere, deci nu este utilizat în mod obișnuit, dar este util în caz de supra-contaminare post-tratament.

Prin urmare, monitorizarea progresează în Franța, unde a devenit obligatorie pentru apa minerală de uz terapeutic (în unitățile termale), în turnurile de răcire a aerului, în orice rețea de apă caldă menajeră dintr-o unitate de sănătate sau în unități sociale și medicale. -Sociale, hoteluri, reședințe turistice, campinguri, unități penitenciare și, în cele din urmă, toate clădirile publice cu dușuri colective de producție de apă caldă menajeră.
La1 st ianuarie 2012, această obligație este extinsă la alte unități deschise publicului (ERP).
DGS și DGPR au recunoscut în 2009 că metoda de cultură (obligatorie în Franța) impune o întârziere după cultivare (sunt necesare cel puțin 8 zile de cultură, deși sunt posibile rezultate intermediare și obligatorii în caz de depășire între 3 și 5 zile), ceea ce dăunează celei mai bune gestionări a instalațiilor și optimizării termenelor pentru ridicarea măsurilor restrictive de utilizare a apei. În plus, nu ia în considerare toate formele de Legionella, deoarece există o serie de Legionella și alte bacterii viabile prezente în apă, dar pe care nu știm să le cultivăm.
O opinie și un raport (2011) din expertiza colectivă a ANSES au evaluat metodele de detectare și numărare a legionelei în apă , concluzionând că doar două metode sunt „suficient de relevante și robuste”  ; metoda culturii de reglementare (standardul NF T90 431) și (mai rapidă, dar nu de reglementare în decretele ECS și TAR) PCR cantitativă (standardul NF T90 471).

În prezent, nu există un sistem portabil capabil să efectueze enumerarea Legionella.

Este obligatoriu pe rețelele de apă caldă menajeră și TAR prin intermediul carnetelor sanitare ECS sau TAR:

Monitorizarea bacteriologică este obligatorie (într-un mediu spitalicesc deseori efectuat de un tehnician biohigienist ):

În afară de probele microbiologice:

În unitățile de sănătate, procedurile privind rețeaua de apă trebuie să fie validate de CLIN-ul unității. În cazul unei alerte, conducerea și CLIN trebuie notificate.

Protecţie

În cazul intervenției tehnice asupra rețelei de apă, personalul trebuie protejat de orice aerosolizare a apei, în special atunci când lucrează la rețeaua de apă caldă. Mască FFP3 purtată.

Mănușile nu sunt necesare pentru protecția împotriva Legionella. Legioneloza este o infecție strict respiratorie, nu există infecții ale pielii cu Legionella .

Bacteriologie

Bacteriile din genul Legionella sunt bacili gram-negativi (dar rareori vizibili la examinarea directă), sunt mobili (1 sau 2 flageli polari), aerobe stricte , catalază slab pozitivă. Peretele lor are particularitatea de a conține acizi grași nesaturați ramificați. Aceste bacterii sunt deosebit de solicitante și pot fi cultivate numai pe medii speciale care conțin cisteină și fier, cum ar fi mediu CYE ( cărbune , extract de drojdie ), mediu GVPC sau mediu BCYE ( extract de drojdie de cărbune tamponat cu cisteină, fier și cărbune. Activ, negru mediu colorat pentru a preveni ca radicalii liberi să ucidă legionella in vitro .

BMPA alfa

Este un mediu de cultură utilizat pentru izolarea selectivă a Legionella; se mai numește agar Legionella

Decretele care reglementează riscul de legionella pe instalații

Note și referințe

  1. (în) Farhat M Trouilhe TM Brand E Moletta-Denat M Robine E, Brother J, "Development of a pilotscale 1 for Legionella elimination in biofilm in water hot network: heat shock treatment treatment" Journal of Applied Microbiology 2010; 108: 1073 -1082
  2. (în) Kuiper MW Wullings BA, ADL Akkermans, RR Beumer, Van der Kooij D, "Proliferarea intracelulară a Legionella pneumophila în Hartmannella vermiformis în biofilmele acvatice cultivate este clorură de polivinil plastifiat" Microbiol aplic Aprox . 2004; 70: 6826-6833
  3. (în) Bouyer S, C Imbert, Rodier MH Héchard Y, „Supraviețuirea pe termen lung a Legionella pneumophila asociată cu veziculele Acanthamoeba castellanii ” Aproximativ Microbiol . 2007; 9: 1341-1344.
  4. (en) Brieland J, McClain M, LeGendre M, Engleberg C, „Intrapulmonary Hartmannella vermiformis : a potential niche for Legionella pneumophila replication in a murine model of legionellosis” Infect Immun . 1997; 65: 4892-4896.
  5. (în) Baron PA, Willeke K "Picături de respirație din vâlte: măsurători ale distribuției mărimii și estimarea bolii potențiale" Aproximativ Res . 1986; 39: 8-18.
  6. Bollin GE, Plouffe JF, Para MF, Hackman B (1985) Aerosoli care conțin Legionella pneumophila generate de capete de duș și robinete cu apă caldă. Microbiologie aplicată și de mediu 50, 1128-1131.
  7. (în) Beauty J Zucs P, de Jong B; Rețeaua europeană de supraveghere a bolilor legionarilor și colab. (77), „  Boala legionarilor în Europa, 2009-2010  ” , Euro Surveill , vol.  18, n o  10,2013, p.  20417. ( PMID  23515061 , citiți online [html] )
  8. Revizuirea cazurilor de legioneloză care au avut loc în Franța în 2013 pe site-ul Invs
  9. (în) Declerck P (2010) „Biofilms: the playground of environment Legionella pneumophila” Aproximativ Microbiol. 12, 557-566.
  10. (în) Lee HJ, Ho MR, Bhuwan M, Hsu CY, Huang MS, Peng HL, Chang HY (2010) "Îmbunătățirea detectării bacteriilor bazate pe ATP și a biofilmului prin regenerarea enzimatică a pirofosfatului" Biochimie analitică 399, 168-173
  11. (în) Murga R Forster TS, Brown E, Pruckler JM Fields BS, Donlan RM (2001) "Rolul biofilmelor în supraviețuirea Legionella pneumophila într-un model de sistem de apă potabilă" Microbiologie 147, 3121-3126.
  12. (în) Moritz M. Flemming HC Wingender J (2010) "Integrarea Pseudomonas aeruginosa și Legionella pneumophila în biofilmele de apă potabilă cultivate cu un material sanitar domestic" Int J Hyg Environ Health 213, 190-197.
  13. (în) Rogers J Dowsett AB, Dennis PJ, Lee JV, Keevil CW (1994) "Influența temperaturii și a selectării materialului sanitar este formarea biofilmului și creșterea Legionella pneumophila într-un sistem de apă potabilă model care conține floră microbiană complexă" Aplicată și de mediu Microbiologie 60, 1585-1592.
  14. (în) Van der Kooij D Veenendaal HR WJH Scheffer (2005) "Formarea biofilmului și multiplicarea Legionella într-un sistem model cu conducte de apă caldă din cupru, oțel inoxidabil și polietilenă reticulată" Water Research 39, 2789-2798
  15. (în) Barer MR, Smith RJ, PR Cooney, Kimmitt PT (2000) „Relațiile dintre culturabilitate, activitate și virulență în bacteriile patogene” J Infect.Chemother. 6, 108-111
  16. (în) Abu Kwaik Y, Gao LY, BJ Stone, Venkataraman C. Harb OS (1998) "Invazia protozoarelor de către Legionella pneumophila și rolul său în patogeneza și ecologia bacteriană" Appl.Environ.Microbiol. 64, 3127-3133
  17. (în) Berk SG, Ting RS Turner GW Ashburn RJ (1998) „Producția de vezicule respirabile care conțin celule vii de către două Legionella Acanthamoeba spp. » Appl.Environ.Microbiol. 64, 279-286.
  18. ANSES aviz și raport cu privire la enumerarea legionella în apă; Anses, publicat: 18 iulie 2011
  19. (în) Campese C, D Bitar, Jarraud S, Maine C, F Forey, Stephen J, Desenclos AD Saura C. Che D. (2010) "Progres în monitorizarea și controlul infecției cu Legionella în Franța 1998-2008" Int J Infect Dis.
  20. Laurent Radisson, „Legionella în apă: ANSES listează metodele de detectare” Bulletin d'Actu-Environnement  ; 10 august 2011
  21. (în) Byrd JJ, Xu HS, Colwell RR (1991) „Obiectiv viabil bacteriile neculturabile în apa potabilă” Appl Microbiol Aprox. 57, 875-878.
  22. (în) Ballard AL Fry NK Chan L Surman SB, Lee JV, TG Harrison, KJ Towner (2000) "Detectarea Legionella pneumophila folosind un test de hibridizare PCR în timp real" J. Clin. Microbiol. 38, 4215-4218
  23. Decret din 14 decembrie 2013 privind cerințele generale aplicabile instalațiilor care intră sub regimul de înregistrare la poziția nr. 2921 din nomenclatura instalațiilor clasificate pentru protecția mediului ( citiți online )

Vezi și tu

Articole similare

linkuri externe

Bibliografie

  1. Olivier Dauptain, Ghid comparativ al decretelor 2004-2014 - Evoluția secțiunii 2921 - Gestionarea riscului legionelelor pe turnurile de răcire - co-scris cu P.Rambeau , Franța, ediția Anexo,2014, 60  p. ( ISBN  978-2-9548250-0-7 )