Biacore

Biacore este denumirea comercială a unui dispozitiv pentru măsurarea interacțiunilor proteine ​​/ proteine ​​sau proteine ​​/ ligand și a constantelor de afinitate. Această tehnologie se bazează pe SPR (rezonanță plasmonică de suprafață).

Detaliu de asamblare

Așa-numita proteină ligand este legată de un cip format dintr-un strat de dextran plasat pe o frunză de aur, el însuși plasat pe o placă de sticlă. Acest strat este intercalat între o celulă microfluidică și o prismă.

Cealaltă proteină este trecută în celula microfluidică și interacțiunea este analizată prin semnalul SPR.

Principiul detectării

Un fascicul de lumină monocromatică polarizată luminează o interfață de sticlă între două medii cu indici de refracție diferiți , deoarece unghiul de incidență este mai mare decât unghiul de limitare (care este egal cu arcsin (n2 / n1)), toată lumina este reflectată, aceasta este numit fenomen de reflexie interna totala. Atunci nu există refracție, ci o componentă electromagnetică a luminii, unda evanescentă se propagă pe o distanță echivalentă cu propria lungime de undă, perpendiculară pe interfață.

La nivelul frunzei de aur situată la interfața dintre cele 2 medii, se observă o rezonanță între plasmonii de aur și unda evanescentă, ceea ce are ca rezultat o pierdere de energie luminoasă la nivelul fasciculului reflectat .nivelul unui unghi precis numit unghiul de rezonanță . Acest unghi este sensibil la indicele de refracție al mediului în care se propagă unda evanescentă.

O măsurare continuă a variațiilor unghiului de refracție se efectuează folosind un micro-refractometru care produce o sensorgramă care face posibilă urmărirea în timp real a legării moleculelor injectate în celula microfluidică. Semnalul de rezonanță este exprimat în unități de rezonanță (RU) și reflectă ceea ce este prezent la un moment dat în celula microfluidică.

Procesul de măsurare

Interes

Bibliografie